采集呼吸道标本检测百日咳鲍特菌,优先推荐采集鼻咽拭子,其次鼻咽吸取液。
(1)对于鼻咽拭子,推荐使用涤纶、人造丝或者植绒拭子。若用于细菌培养,如果不能立即接种平板,则将鼻咽拭子置于Regan-Lowe运送培养基中,保存温度为2~8℃,应在24h内运送至实验室;若仅用于PCR检测,则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或者含通用转运液),冻存于-20℃及以下温度。
(2)对于鼻咽吸取液,无菌吸取至少0.5ml样品于防渗漏的无菌塑料管中,若72h内可运送至实验室,则置于2~8℃保存,否则冻存于-20℃及以下的温度。
有2项研究探讨了呼吸道标本种类对百日咳鲍特菌的分离培养的影响:1项美国研究显示,鼻咽拭子的百日咳鲍特菌分离阳性率为95%,而咽拭子的阳性率仅为44%(相应的鼻咽拭子皆为阳性);另1项克罗地亚的研究显示,鼻咽拭子和鼻咽吸取液的百日咳鲍特菌分离阳性率皆为73.9%,而咽拭子仅为17.0%(相应的鼻咽拭子皆为阳性)。有1项研究专门探讨了不同材料的拭子(藻酸钙、涤纶和植绒)采集鼻咽部样品后对百日咳鲍特菌的分离培养和PCR的影响,发现藻酸钙拭子会抑制PCR反应,而3种材料的拭子都可用于百日咳鲍特菌的分离培养,并发现含炭的Amies运送液效果差。1项研究比较不同运输温度(分别为-20、4、25和35℃)和运输介质[Regan‑Lowe运送培养基、Regan‑Lowe及半强度琼脂运送培养基、添加α‑酮戊二酸、林可霉素和山莨菪碱的缓冲炭酵母提取物琼脂(BCYEαLA)运送培养基]对百日咳鲍特菌存活情况的影响,结果显示4℃时使用Regan‑Lowe运送培养基运输百日咳鲍特菌存活率最高。另1项研究显示,与4和-20℃相比,存储于-70℃悬浮液中的百日咳鲍特菌存活率更高。
WHO关于百日咳(2018版)采样标本的推荐:咳嗽4周内,使用无菌的涤纶、人造丝或植绒拭子尽量采集双份鼻咽拭子(可使用鼻咽吸取液),一份用于细菌培养,另一份用于PCR检测。用于培养者需立即接种平板或者将鼻咽拭子放入Regan‑Lowe运送培养基中(勿使用Amies或者通用运送液),室温放置,于24h内送至实验室进行接种;仅用于PCR检测者则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或含通用转运液)转运至实验室;咳嗽4~12周内,则收集血清标本,用于抗体的检测。美国CDC推荐:使用涤纶、人造丝或者植绒拭子,无菌采集鼻咽拭子后,若用于细菌培养,置于Regan‑Lowe运送培养基或含炭的Amies运送管中,保存温度为2~8℃,并于24~72h内运送;若仅用于PCR检测,则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或者含通用转运液),置于-20℃及以下冻存。对于鼻咽吸取液,无菌吸取至少0.5ml样品,置于防渗漏的无菌塑料管中,2~8℃保存,在72h内运送至实验室,否则于-20℃及以下冻存。
资料来源:中华医学会感染病学分会儿科感染学组, 国家卫生健康委能力建设和继续教育儿科专委会感染组, 中国临床实践指南联盟方法学专委会, 等. 中国百日咳诊疗与预防指南(2024版) [J] . 中华医学杂志, 2024, 104(15) : 1258-1279. DOI: 10.3760/cma.j.cn112137-20240124-00179.